2× FastLong Taq PCR Master Mix PCR相關(guān)
本產(chǎn)品包含F(xiàn)astLong Taq DNA Polymerase、dNTPs和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,濃度為2×,擴(kuò)增速度(5-10s/kb)是普通Taq mix速度的6倍,保真度是Taq酶的3倍, 適用于擴(kuò)增各種小于10Kb的DNA模板!2× FastLong Taq PCR Master Mix PCR相關(guān)
2× FastLong Taq PCR Master Mix(含染料)
2× FastLong Taq PCR Master Mix PCR相關(guān)
目錄號(hào):71810
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 71810-05 | 71810-0100 |
2× FastLong Taq PCR Master Mix | 5x 1ml | 100x 1ml |
保存條件
-20℃保存,有效期 2 年。經(jīng)常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 個(gè)月。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品包含F(xiàn)astLong Taq DNA Polymerase、dNTPs和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,濃度為2×,擴(kuò)增速度(5-10s/kb)是普通Taq mix速度的6倍,保真度是Taq酶的3倍, 適用于擴(kuò)增各種小于10Kb的DNA模板!
PCR產(chǎn)物3’端帶A尾,純化后可直接用于TA載體克?。–at#V114-20)。
本產(chǎn)品含紅色示蹤染料,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進(jìn)行電泳;也可經(jīng)過純化處理,以用于酶切、連接、測(cè)序等后續(xù)操作。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 高產(chǎn):產(chǎn)量是普通 Taq 酶的 2 倍!
2. 高效:延伸速度 5-10s/kb,一般 0.5 小時(shí)完成 PCR!
3. 高成功率:對(duì)于高 GC 模板和特殊結(jié)構(gòu)的復(fù)雜模板有良好效果!
2× FastLong Taq PCR Master Mix 使用說明:
一、配制 PCR 反應(yīng)體系:(于冰上配制)
Component | 20 μl Reaction | 50 μl Reaction | FinalConcentration |
2×FastLongTaqPCRMix | 10 μl | 25 μl | 1 × |
Forward Primer (10μM) | 0.4 μl | 1 μl | 0.2 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.4 μl | 1 μl | 0.2 μM |
Template DNA | as required | as required | |
ddH2O | up to 20 μl | up to 50 μl |
參考模板用量(50 μl 反應(yīng)體系):
質(zhì)粒:0.1-10 ng;細(xì)菌基因組:10-100 ng;人類基因組:50-150 ng;cDNA:1-5 μl 。
二、建議 PCR 循環(huán)條件:
Step | Temperature | Time | Cycle Number |
Initial denaturation | 94℃ | 3 minutes | |
Denaturation | 94℃ | 10 seconds | 25-35 cycles |
Annealing | 55℃ | 10 seconds | |
Extension | 72℃ | 10 seconds / kb | |
Final Extension | 72℃ | 5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
注意事項(xiàng):
a. 片段≥3kb 或產(chǎn)量較低時(shí),可以采用 15-20 秒/kb 的延伸速度或采用較多循環(huán)數(shù)。
b. 對(duì)于高 GC 含量或者有二級(jí)結(jié)構(gòu)的模板,應(yīng)該適當(dāng)延長預(yù)變性時(shí)間到 5 分鐘,變性時(shí)間可以適當(dāng)提高 5-10 秒。擴(kuò)增效果不佳時(shí),還可加入 DMSO 到終濃度 1-8%。
2× FastLong Taq PCR Master Mix PCR相關(guān)